慢病毒包裝專用馴化293T細(xì)胞是在通用293T細(xì)胞的基礎(chǔ)上，對(duì)其進(jìn)行生長(zhǎng)馴化，挑選轉(zhuǎn)染效率較高的單克`隆株進(jìn)行擴(kuò)增，未進(jìn)行任何基因編輯。馴化后的293T細(xì)胞更喜高密度生長(zhǎng)，更適合用于轉(zhuǎn)染、慢病毒包裝等，特別是慢病毒包裝出毒效率和產(chǎn)量相較普通293T細(xì)胞有大幅提升，并且貼壁生長(zhǎng)更牢固，生長(zhǎng)速度更快。

293T細(xì)胞是人胚腎細(xì)胞系（HEK293）的衍生株，表達(dá)SV40大T抗原，常用于病毒包裝、蛋白表達(dá)和轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。慢病毒包裝專用馴化293T細(xì)胞是在通用293T細(xì)胞的基礎(chǔ)上，對(duì)其進(jìn)行生長(zhǎng)馴化，挑選轉(zhuǎn)染效率較高的單克`隆株進(jìn)行擴(kuò)增，未進(jìn)行任何基因編輯。馴化后的293T細(xì)胞更喜高密度生長(zhǎng)，更適合用于轉(zhuǎn)染、慢病毒包裝等，特別是慢病毒包裝出毒效率和產(chǎn)量相較普通293T細(xì)胞有大幅提升，并且貼壁生長(zhǎng)更牢固，生長(zhǎng)速度更快。

產(chǎn)品信息：

細(xì)胞處理：

1、細(xì)胞復(fù)蘇

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含2mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。1000 rpm或400g離心5min，棄上清，5mL DMEM完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶（或6cm培養(yǎng)皿）中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2、細(xì)胞傳代

當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)90%以上即可進(jìn)行傳代。輕柔棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS緩慢輕柔清洗1次，目的是將培養(yǎng)基中的FBS洗掉，以免影響胰酶的消化。隨后加入含EDTA的0.25％胰酶（T25瓶0.5-1mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-3min（不超過(guò)5min），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入2-4mL完全培養(yǎng)基終止消化。用移液槍或巴氏管輕輕捶打均勻后吸出，1000 rpm或400g離心5min，棄上清，加1-2mL完全培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新培養(yǎng)瓶或皿中，添加5mL DMEM完全培養(yǎng)基十字交叉法混勻后繼續(xù)培養(yǎng)。

3、細(xì)胞凍存

收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前三代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過(guò)程收集消化好的細(xì)胞到離心管中，使用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行計(jì)數(shù)，隨后離心去上清，按照每1mL凍存液凍存5×106左右個(gè)細(xì)胞計(jì)算，取適量高效高活細(xì)胞凍存液（貨號(hào)MJ105）吹打混勻細(xì)胞后按照每個(gè)1mL分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。將用高效高活細(xì)胞凍存液凍存的細(xì)胞直接放進(jìn)-80℃超低溫冰箱中無(wú)需程序降溫，可長(zhǎng)期凍存（>5年），同時(shí)記錄好凍存管在冰箱中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項(xiàng)：

1、所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄；

2、本產(chǎn)品為無(wú)菌狀態(tài)，使用本產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免污染；